ПРИМЕНЕНИЯ
AmniSure ROM тест – это экспресс-тест для не инструментального качественного иммунохроматографического определения амниотической жидкости в вагинальном секрете будущей мамы in vitro. Тест предназначен для использования в акушерско-гинекологической практике в  качестве средства установления наличия разрывов плодных оболочек у беременных мам, имеющих подозрения на подобные разрывы.
 
 ДЕЙСТВИЕ ТЕСТА
Проба выделений из влагалища, берется влагалищным тампоном и помещается в пробирку с растворителем. Растворитель в течение одной минуты экстрагирует пробу из тампона, после чего тампон выбрасывается. Потом в пробирку погружается тестовая полоска AmniSure. Содержимое пробы перемещается из  области погружения в  область тестовой полоски. Результат теста визуально считывается через пять-десять минут по наличию одной или двух полос. Тест использует принцип иммунохроматографии  для определения человеческого плацентарного ?1микроглобулина (ПАМГ-1, PAMG-1). ПАМГ-1 был выбран с этой целью благодаря своим уникальным характеристикам: высокому содержанию в околоплодных водах, низкому уровню в крови и чрезвычайно низкой (50-220 пг/мл) концентрации в секрете влагалища и шейки матки при неповрежденном пузыре. Тест использует высокочувствительные моноклональные антитела, которые выявляют  минимальное количество белка, появляющегося во влагалище после начала подтекания вод. Для минимизации частоты ложноотрицательных результатов, в тесте используется специально подобранная комбинация из 2-х моноклональных антител, которая обеспечивает порог чувствительности теста на оптимально низком уровне. Фоновый уровень ПАМГ-I в секрете влагалища чрезвычайно низок (0,05 - 0,005 мг в одной капле). Пороговая концентрация ПАМГ-I, которую можно определять с помощью  комбинации антител, составляет 50 - 220 пг (т. е. 0,05 - 0,22 нг) в одном мл секрета влагалища. Порог чувствительности теста был специально повышен в двадцать раз до 5 - 7 нг/мл, что позволило повысить точность теста до 99% за счет устранения ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Во время процедуры ПАМГ-I из пробы последовательно связывается с моноклональными антителами A (A-Mab), конъюгированными с меткой, а затем с моноклональными антителами B (B-Mab), иммобилизованными на нерастворимом носителе. Когда антитела A-Mab входят в контакт с ПАМГ-I в зоне погружения, они захватывают ПАМГ-I и транспортируют его в тестовую зону. Тестовая зона тест-полоски имеет полосу, где находятся иммобилизованные антитела B-Mab. Антитела B-Mab “встречают” ПАМГ-I, приносимый мобильными антителами A-Mab из зоны погружения. Эта “встреча” иммобилизует комплекс ПАМГ-I/A-Mab, в результате чего появляется буро-желтая Тестовая Линия в тестовой области. Это окрашивание возникает в результате наличия красителя на основе коллоидного золота, связанного с антителами A-Mab. Наличие такого окрашивания указывает на подтекание вод. Вторая (Контрольная) Линия предназначена для того, чтобы проверить, работает ли тест-набор правильно. Эта полоска появляется, когда иммуноглобулины G кролика против антигенов мыши соединятся с мышиными антителами с красителем. Если реакция происходит, появляется Контрольная Линия.
 
РЕАГЕНТЫ И КОМПОНЕНТЫ
Состав набора:
1. Инструкция.
2. Тест-полоска AmniSure в пакете из фольги с поглотителем влаги.
3. Стерильный влагалищный полиэстеровый тампон.
4.  Пластиковая пробирка с растворителем.
 
ПРОЦЕДУРА ТЕСТИРОВАНИЯ
1.      Возьмите пробирку с растворителем за крышечку и хорошо встряхните. Убедившись, что вся жидкость внутри пробирки опустилась на дно, откройте пробирку и поставьте в штатив в вертикальном положении. 2.      Для сбора пробы с поверхности влагалища возьмите стерильный полиэстеровый тампон, входящий в состав набора. Выньте стерильный тампон из упаковки, согласно инструкции на упаковке. До введения во влагалище кончик тампона не должен ни с чем соприкасаться. Возьмите тампон за середину ручки и осторожно введите полиэстеровый кончик тампона во влагалище на глубину не более 5 - 7 см. Оставьте тампон во влагалище на 1 минуту, и только после этого выньте его. 3.      Погрузите полиэстеровый конец тампона в пробирку и промойте тампон в растворе, вращая тампон в течение 1 минуты. 4.      Выньте тампон и поместите его в дезинфицирующий раствор для обработки биологических отходов. 5.      Вскройте пакет из фольги в местах надреза и выньте тест-полоску AmniSure. 6.      Погрузите белый конец тест-полоски (обозначенный стрелками) в пробирку с растворителем и оставьте его не менее чем на 5 и не более чем на 10 минут. Массивное вытекание околоплодных вод сделает результат видимым рано (после 5 мин), а небольшое подтекание станет видимым только через 10 минут. 7.      Выньте тест-полоску из пробирки, если проявились обе полоски (но не ранее 5 минут) или ровно через 10 минут после погружения. Прочтите результаты, положив тест-полоску на чистую сухую и плоскую поверхность. Не считывайте результаты, если истекло более 15 минут после погружения тест-полоски в пробирку.
 
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Каждый тест AmniSure имеет набор встроенных реагентов и процедурных контролей, необходимых для правильной работы. Появление одной или двух полосок в зоне результатов свидетельствует о рабочем состоянии теста. Если видна только одна контрольная полоска, результат теста отрицательный.
 
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Подтекание околоплодных вод однозначно указывает на разрыв оболочек плодного яйца у всех женщин. Исследования плацентарного ?1-микроглобулина установили, что он является маркером околоплодных вод. Были измерены концентрации ПАМГ-1 в секрете шейки матки и влагалища у женщин с неосложненным течением беременности. Они колебались между 0,05 и 0,22 нг/мл. В условиях кольпита или незначительной примеси сыворотки крови фоновый уровень ПАМГ-1 может достигать не более 3 нг/мл. Концентрация ПАМГ-1 в околоплодных водах составляет 2000 - 25000 нг/мл. Клинически значимое подтекание околоплодных вод повышает концентрацию ПАМГ-1 во влагалище в тысячи раз. Порог чувствительности теста AmniSure установлен в 20 раз выше базальных концентраций ПАМГ-1 во влагалище (5 нг/мл ПАМГ-1). Это устранило влияние колебаний базальных значений ПАМГ-1 на результаты теста во всех исследованных группах населения.